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熒光定量PCR的效率值

更新時(shí)間:2020-07-15      點(diǎn)擊次數(shù):2979

熒光定量PCR的效率值可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線獲取。理想的反應(yīng)效率為100%。效率較高(高于110%)一般說明反應(yīng)過程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA質(zhì)量較差,模板濃度過高及含有核酸鈍化的殘余物。反應(yīng)效率較低(低于90%)的原因有試劑濃度不適(主要是引物、鎂、Taq 、 DNA、聚合酶、尤其是在多重試驗(yàn)中)。造成效率低的其他因素有引物  T  m之間的差異超過5℃或者是熱循環(huán)條件不適。抑制作用和較低的效率會(huì)影響分析的靈敏度,導(dǎo)致動(dòng)態(tài)范圍減小及通用性降低。怎樣解決呢?可在做凍干時(shí)降低模板濃度,優(yōu)化工藝曲線等。試劑凍干機(jī)Pilot7-12T提供對(duì)藥品、診斷試劑、蛋白、多肽、酶、抗體、抗原等進(jìn)行凍干工藝優(yōu)化,包括保護(hù)劑篩選、凍干曲線優(yōu)化、凍干穩(wěn)定性測(cè)試、凍干生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)等。

 

 

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